जैव प्रौद्योगिकी - सिद्धांत और प्रक्रियाएं - भाग 6

ट्रांसफॉर्मेशन:

बायोटेक्नोलॉजी में एक प्रक्रिया जिससे विदेशी डीएनए को किसी होस्ट जीव में पेश किया जाता है।

होस्ट सेल झिल्ली की पारगम्यता बदलकर विदेशी डीएनए को अवशोषित करने में मदद करता है।

जेनेटिक इंजीनियरिंग में आधारभूत तकनीक है जिससे जेनेटिकली मॉडिफाइड ऑर्गेनिज्म्स (जीएमओ) बनाए जाते हैं।

ट्रांसफॉर्मेशन की खोज:

फ्रेडरिक ग्रिफिथ ने 1928 में खोज की।

उन्होंने देखा कि हीट-किल्ड रोगजनक बैक्टीरिया गैर-रोगजनक बैक्टीरिया को रोगजनक रूप में बदल सकते हैं।

जेनेटिक मटीरियल ट्रांसफर को समझने में महत्वपूर्ण था।

कॉम्पिटेंट सेल्स:

होस्ट सेल्स को इस तरह ट्रीट किया जाता है कि वे विदेशी डीएनए को आसानी से अवशोषित कर सकें।

रासायनिक ट्रीटमेंट या इलेक्ट्रोपोरेशन से झिल्ली को अधिक पारगम्य बनाया जाता है।

रिकॉम्बिनेंट डीएनए को प्रभावी ढंग से पेश करने की अनुमति देता है।

रिकॉम्बिनेंट क्लोन्स की स्क्रीनिंग:

उन होस्ट सेल्स की पहचान करना जिनमें रिकॉम्बिनेंट डीएनए शामिल हो गया है।

विधियों में एंटीबायोटिक रेजिस्टेंस मार्कर्स, रिपोर्टर जीन और डीएनए सीक्वेंसिंग शामिल हैं।

इस बात को सुनिश्चित करता है कि केवल वही सेल्स चुनी जाएं जिनमें वांछित जेनेटिक बदलाव हों।

होस्ट और वेक्टर्स की पसंद:

होस्ट जीव और वेक्टर (प्लाज्मिड या वायरल डीएनए) का चयन महत्वपूर्ण होता है।

विभिन्न जीव और वेक्टर्स के पास विशिष्ट अनुप्रयोगों के लिए अनोखे गुण होते हैं।

ई. कोलाई आणविक क्लोनिंग के लिए आमतौर पर उपयोग किया जाता है क्योंकि यह तेजी से बढ़ता है और इसका जेनेटिक्स अच्छी तरह समझा गया है।

माइक्रोबियल ग्रोथ और प्रोटीन उत्पादन:

प्रोटीन उत्पादन के लिए माइक्रोबियल ग्रोथ आवश्यक होता है।

होस्ट जीवों को नियंत्रित परिस्थितियों (पोषक तत्व, तापमान, वातन) में उगाया जाता है।

इससे रिकॉम्बिनेंट प्रोटीन का अभिव्यक्तन होता है जो चिकित्सा और औद्योगिक अनुप्रयोगों के लिए उपयोगी होता है।

औद्योगिक स्तर पर प्रोटीन उत्पादन:

फार्मास्युटिकल्स और जैव-विनिर्माण में मांगों को पूरा करने के लिए महत्वपूर्ण।

जैव-प्रतिक्रियाकर्ता (बड़े किण्वन पात्र) का उपयोग कुशल और किफायती प्रोटीन उत्पादन के लिए सूक्ष्मजीवी कोशिकाओं को विकसित करने के लिए किया जाता है।

डाउनस्ट्रीम प्रोसेसिंग:

सूक्ष्मजीवी वृद्धि और प्रोटीन उत्पादन के बाद आता है।

कोशिकीय घटकों से लक्ष्य प्रोटीन को शुद्ध करने, अलग करने और पृथक करने को शामिल करता है।

क्रोमैटोग्राफी, निस्यंदन और सेंट्रीफ्यूजेशन जैसी तकनीकों का उपयोग शुद्ध, कार्यात्मक प्रोटीन प्राप्त करने के लिए किया जाता है।