जैव प्रौद्योगिकी के सिद्धांत और प्रक्रियाएं भाग 3

वेक्टर#

1. रेप्लिकेशन का उद्गम (Origin of Replication)

• वह डीएनए अनुक्रम जहाँ प्रतिकृति प्रारंभ होती है
• वेक्टर को होस्ट कोशिका में स्वतंत्र रूप से प्रतिकृत होने की अनुमति देता है

2. चयन योग्य चिह्न (Selectable Markers)

• प्रतिरोधक या विशिष्ट लक्षण प्रदान करने वाले जीन
• रूपांतरित कोशिकाओं की पहचान और चयन में सहायता करते हैं

3. क्लोनिंग स्थल (Cloning Sites)

• अद्वितीय प्रतिबंधक एंजाइम पहचान अनुक्रम
• विदेशी डीएनए को विशिष्ट स्थानों पर सम्मिलित करने की अनुमति देते हैं

4. विशिष्ट वेक्टर (Specialized Vectors)

• विशिष्ट अनुप्रयोगों (अभिव्यक्ति, शटल) के लिए विशेष रूप से बनाए गए
• विशिष्ट होस्ट जीवों के लिए अतिरिक्त विशेषताएँ रखते हैं

होस्ट रूपांतरण विधियाँ#

1. रासायनिक विधि

• कोशिकाओं को सक्षम बनाने के लिए कैल्शियम क्लोराइड का उपयोग
• हीट शॉक सेल झिल्ली के माध्यम से डीएनए ग्रहण को सक्षम करता है

2. सूक्ष्म-इंजेक्शन

• डीएनए को सीधे कोशिका के नाभिक में इंजेक्ट करना
• सटीक लेकिन श्रमसाध्य विधि

3. बायोलिस्टिक्स

• डीएनए से लेपित सोने के कणों को कोशिकाओं में गोली मारना
• कठोर सेल दीवालों वाली पादप कोशिकाओं के लिए उपयुक्त

4. वेक्टर-माध्यमित स्थानांतरण

• एग्रोबैक्टीरियम जैसे जैविक वेक्टर का उपयोग
• होस्ट कोशिकाओं में प्राकृतिक डीएनए स्थानांतरण तंत्र