10.1 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಾಹಿತಿ

10.1.1 ಪರಿಚಯ

ಯಾವುದೇ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬಗ್ಗೆ ಮಾಹಿತಿ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದ ತಂತ್ರಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸುವುದು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಇನ್ಫಾರ್ಮ್ಯಾಟಿಕ್ಸ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರೋಟೀನ್ ಇನ್ಫಾರ್ಮ್ಯಾಟಿಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಅಹ್ಯತನದ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಕಾರ್ಯಾಂಗಕರ ಸ್ಥಳದ ಜ್ಯಾಮಿತಿ, ರಸಾಯನಿಕ ಕಾರ್ಯ ಮತ್ತು ಜೀವನೋಪಾಯದ ಕಾರ್ಯಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಅತ್ಯಂತ ಸಹಾಯಕವಾಗಿದೆ. ಇದು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ವಿಧಗಳಿಂದ ಅರಿವಾಗದ ಅಹ್ಯತನದ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ತ್ರೈತರಹಿತ ರಚನೆಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಕೂಡ ಕಾರಣವಾಗಿದೆ. ಪ್ರೋಟೀನೋಮ್ ಪರಿಸರದಲ್ಲಿ ಅಣಿಯಾದ ವಿಭಿನ್ನ ದತ್ತಸಂಚಯಗಳು ಮತ್ತು ಅಷ್ಟಣಗಳು, ಅಷ್ಟಣಗಳ ಕ್ರಮವಾಗಿನ ತ್ರೈತರಹಿತ ರಚನೆಗಳು ಮತ್ತು ಪಾಥ್‌ವೇಗಗಳು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಇನ್ಫಾರ್ಮ್ಯಾಟಿಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿ ಹಾಗೂ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಕೊಡಲು ಸಹಾಯಕವಾಗಿದೆ.

10.1.2 ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಾಹಿತಿಯ ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರಕಾರಗಳು

ಮಾಹಿತಿ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಾಹಿತಿಯ ಮೂಲ ದತ್ತಾಂಶವನ್ನು ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ಈ ಪ್ರೋಟೀನ್ ದತ್ತಾಂಶಗಳು ಈ ಕೆಳಗಿನ ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರಕಾರಗಳಾಗಿವೆ -

(i) ಉಷ್ಣವಾಗಿ ಅಣಿಯಾದ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಮೂಹದ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೊಪಿ ಚಿತ್ರ
(ii) ರಸದಲ್ಲಿರುವ ಪ್ರೋಟೀನ್
(iii) ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್ ಅಸಿಸ್ಟೆಡ್ ಲೇಸರ್ ಡೆರಿಗ್ರೇಶನ್/ಐಯೋನಿಜೇಶನ್ (MALDI) ಯ ಫಲಿತಾಂಶವಾಗಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕ್ರಮ
(iv) ಸಂಯೋಜಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕ್ರಮ
(v) ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪದಾರ್ಥ ಬ್ಯಾಂಡಿಂಗ್ ರಚನೆಯನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಡೇಟಾ ಬ್ಯಾಂಕ್ (PDB) ಸ್ವರೂಪದಲ್ಲಿ
(vi) ಪ್ರೋಟೀನ್-ಪ್ರೋಟೀನ್, ಪ್ರೋಟೀನ್-ಲಿಗ್ಯಾಂಡ್ ಅಥವಾ ಪ್ರೋಟೀನ್-ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೇಟ್ ಸಂವಹನದ ಫೈಲ್
(vii) ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯರ್ ಮ್ಯಾಗ್ನೆಟಿಕ್ ರಿಸೋನ್ಎನ್ಸ್ (NMR) ದತ್ತಾಂಶ, ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿ (MS) ದತ್ತಾಂಶ
(viii) ಜೆನೋಮಿಕ್ ಕ್ರಮಗಳಿಂದ ನೇರವಾಗಿ ಪಡೆದ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕ್ರಮಗಳು, ಅದರಲ್ಲಿ ಅಜ್ಞಾತ ಪ್ರತಿಭಾವಂತವನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲ (ಅಹ್ಯತನದ ಪ್ರೋಟೀನ್)

ಮೇಲುವರಿದ ಪ್ರೋಟೀನ್ ದತ್ತಾಂಶಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ಈ ಕೆಳಗಿನ ಉಪಯುಕ್ತ ಮಾಹಿತಿಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಬಹುದು

(i) ಉಷ್ಣವಾಗಿ ಅಣಿಯಾದ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಮೂಹದ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೊಪಿ ಚಿತ್ರದ ಬಹು-ಫ್ರಾಕ್ಟಲ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣವನ್ನು ಪ್ರೋಟೀನ್-ಮಾರ್ಕರ್ ರಚನೆಗೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
(ii) ರಸದಲ್ಲಿರುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ ದತ್ತಾಂಶಗಳು ಭೌತಿಕ-ರಸಾಯನಿಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು ಮತ್ತು ಕಿನೆಟಿಕ್ಸ್ ಮಾಹಿತಿಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಉಪಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ.
(iii) MALDI ಇಂದ ಪಡೆದ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಸ್ವಲ್ಪ ಚಿಕ್ಕ ಕ್ರಮಗಳು ಪೂರ್ಣ ಉದ್ದದ ಕ್ರಮವನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
(iv) ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪದಾರ್ಥ ಬ್ಯಾಂಡಿಂಗ್ ರಚನೆಗಳು ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಮತ್ತು ಸಂವಹನಗಳನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
(v) PDB, NMR ಮತ್ತು MS ದತ್ತಾಂಶಗಳು ಬ್ಯಾಂಡಿಂಗ್ ಮಾಡದ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ರಚನೆಯನ್ನು ಊಹಿಸಲು (ಕ್ರಮದಿಂದಲೇ) ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
(vi) ಅಜ್ಞಾತ ಪ್ರತಿಭಾವಂತಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲದ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು (ಅಹ್ಯತನದ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ) ಜೆನೋಮಿಕ್ ಕ್ರಮಗಳಿಂದ ಗುರುತಿಸಬಹುದು.
(vii) ಪ್ರೋಟೀನ್ ನೆಟ್ವರ್ಕ್ ಮ್ಯಾಪಿಂಗ್ ವಿಭಿನ್ನ ರೋಗಗಳ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ಸಂಭಾವ್ಯ ಗಮನಿಸಬಹುದಾದ ಸ್ಥಳಗಳ ಬಗ್ಗೆ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ.

ಪ್ರೋಟೀನ್ ಇನ್ಫಾರ್ಮ್ಯಾಟಿಕ್ಸ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲು ಈ ಕೆಳಗಿನ ಎರಡು ಮೂಲ ಸೌಲಭ್ಯಗಳ ಅಗತ್ಯವಿದೆ:

(i) NCBI, PDB, CHEMBL, BIOMODELS ಮುಂತಾದ ವಿಭಿನ್ನ ದತ್ತಸಂಚಯಗಳಿಂದ ಮೂಲ ದತ್ತಾಂಶಗಳ ಲಭ್ಯತೆ.
(ii) ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಬಳಸಲಾದ ಇನ್ಫಾರ್ಮ್ಯಾಟಿಕ್ಸ್ ಉಪಕರಣಗಳು ಮತ್ತು ತಂತ್ರಗಳು. ಕೆಲವು ಪ್ರಸಿದ್ಧ ತಂತ್ರಗಳು: (a) ವ್ಯವಕಲನ ತಂತ್ರಗಳ ಮೂಲಕ ಚಿತ್ರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ, (b) ಕ್ರಮದ ಸರಣಿ ಮತ್ತು ಹೋಮೋಲಜಿ ಗಣಕಗಳು, (c) ರಚನೆಯ ಅನುಕೂಲಗಳ ತಂತ್ರಗಳು, (d) ತಜ್ಞರಾದ ನ್ಯೂರಲ್ ನೆಟ್‌ವರ್ಕ್ (ANN), ಸಪೋರ್ಟ್ ವೆಕ್ಟರ್ ಮ್ಯಾಶಿನ್ (SVM) ಮತ್ತು ಹಿಡಿದ ಹಾಮೋರ್ಮ್ ಮಾದರಿ (HMM) ಮುಂತಾದ ತಜ್ಞರಾದ ತಂತ್ರಗಳ ಮೂಲಕ ದತ್ತಾಂಶ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ, (e) ನೆಟ್ವರ್ಕ್ ಮ್ಯಾಪಿಂಗ್ ತಂತ್ರ, ಮತ್ತು (f) ಸಿಸ್ಟಮ್ಸ್ ಬಯೋಲಜಿ ಮಾರ್ಕಪ್ ಲೆಂಗ್ವೇಜ್ (SBML).

10.1.3 ಪ್ರೋಟೀನ್ ರಚನೆಗಳ ಗಣಕಾಂಗತ ಊಹಿಸುವಿಕೆ

ಬಯೋಇನ್ಫಾರ್ಮ್ಯಾಟಿಕ್ಸ್ ಉಪಕರಣಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ರಚನೆಗಳನ್ನು ಊಹಿಸುವುದು ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಅಷ್ಟಣಗಳು ತಮ್ಮ ಅಷ್ಟಣಗಳನ್ನು ಹೇಗೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟಪಡಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಈ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ತಮ್ಮ ಕಾರ್ಯಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು ಸಬ್ಜೆಕ್ಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಅಣುಗಳಿಗೆ ಹೇಗೆ ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳುತ್ತವೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಅನ್ವೇಷಿಸಲು ಗುರಿಯಾಗಿದೆ. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ಕೇವಲ ಜೆನ್ ಕ್ರಮವನ್ನು ತಿಳಿದಿರುವಾಗಲೂ, ಅದರಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕ್ರಮವನ್ನು ತಿಳಿದಿರದಿರುವಾಗಲೂ (ಅಹ್ಯತನದ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಿಗೆ ಸಹ) ಬಯೋಇನ್ಫಾರ್ಮ್ಯಾಟಿಕ್ಸ್ ಉಪಕರಣಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ರಚನೆಯನ್ನು (ಅಹ್ಯತನದ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಲ್ಲದೆ) ಊಹಿಸಬಹುದು. ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ರಚನೆಯ ಮತ್ತು ಭೌತಿಕ-ರಸಾಯನಿಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಊಹಿಸಲು ವಿಭಿನ್ನ ಮೂಲಗಳಿಂದ ಅನೇಕ ಗಣಕಾಂಗ ಉಪಕರಣಗಳು ಲಭ್ಯವಿದೆ. ಗಣಕಾಂಗ ವಿಧಾನಗಳ ಪ್ರಮುಖ ಲಾಭಗಳು ಸಮಯದ ಅಂತರ, ಅತ್ಯಂತ ಹೆಚ್ಚು ವೆಚ್ಚ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚು ತುಂಬಿದ ಸ್ಕ್ರೀನಿಂಗ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ.

10.1.3.1 ಪ್ರಾಥಮಿಕ ರಚನೆಯ ಊಹಿಸುವಿಕೆ

ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ರಚನೆಯ ಊಹಿಸುವಿಕೆಯು ಐಸೊಲೆಕ್ಟ್ರಿಕ್ ಪಾಯಿಂಟ್, ಎಕ್ಸ್ಟ್ರಿನ್ಶನ್ ಕೋಎಫಿಸಿಯೆಂಟ್, ಅಸ್ಥಿರತಾ ಸೂಚಕ, ಅಲಿಪ್ಯಾಟಿಕ್ ಸೂಚಕ ಮತ್ತು ಗ್ರಾಂಡ್ ಅವರೇಜ್ ಹೈಡ್ರೋಫೈವಿ (GRAVY) ಮುಂತಾದ ಭೌತಿಕ-ರಸಾಯನಿಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಈ ಎಲ್ಲಾ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ExPASy ಪ್ರೋಟೀನೋಮಿಕ್ಸ್ ಸರ್ವರ್‌ನ ProtParam ಉಪಕರಣದ ಮೂಲಕ ಲಭ್ಯವಿದ್ದರೆ ಗಣಕಗೊಳಿಸಬಹುದು. ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಕೆಲವು ಭೌತಿಕ-ರಸಾಯನಿಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು ಕೆಳಗಿನ ವಿಭಾಗದಲ್ಲಿ ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ವಿವರಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿವೆ.

ಐಸೊಲೆಕ್ಟ್ರಿಕ್ ಪಾಯಿಂಟ್ - ಐಸೊಲೆಕ್ಟ್ರಿಕ್ ಪಾಯಿಂಟ್ (pI) ಎಂದರೆ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪರದೆಯ ಮೇಲೆ ಬದಲುಗಳು ಇರುವ ಸಮಯದ $\mathrm{pH}$, ಆದರೆ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಒಟ್ಟಾರೆ ಬದಲುಗಳು ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಸ�